Baseado no passeio temático do parque da Disney, o filme é ambientado no início do século 20, com o capitão de um barco fluvial chamado Frank (Dwayne Johnson) levando a cientista Dra. Lily Houghton (Emily Blunt) e seu irmão em uma missão na selva para encontrar a Árvore da Vida, que se acredita possuir poderes de cura que poderiam ser de grande benefício para a medicina moderna. Ao mesmo tempo, o trio deve lutar contra animais selvagens perigosos, um ambiente quente e mortal e uma expedição alemã competitiva que está determinada a encontrar a árvore primeiro.